技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一类具有抗癌活性的双喹唑啉席夫碱衍生物及其制备与医药用途。

背景技术

喹唑啉类化合物是一类具有良好生物活性的含氮杂环化合物，其在抗菌、抗炎、抗高血压和抗癌等方面都显示出优良的活性，目前已有多个具有喹唑啉结构的小分子药物上市，如EGFR抑制剂吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼等等。此前也有较多基于此类喹唑啉结构开展的研究，例如CN201510875007、CN2017108670950、CN201210469118.X等。

席夫碱及其衍生物，具有抑菌、抗癌等活性，并且由于席夫碱合成方便，活性较高，成为药物研发中的重要结构，是极有价值的药效基团。

为开发新的抗肿瘤药物，设计合成了双喹唑啉席夫碱化合物，其是通过席夫碱结构连接两个喹唑啉结构单元，此类双喹唑啉席夫碱化合物在生物医药领域具有潜在的应用前景。

发明内容

本发明目的在于提供一类双喹唑啉席夫碱化合物及其制备与应用。

本发明提供的一种双喹唑啉席夫碱化合物，其结构如通式(I)所示：

其中Ar为亚芳基或亚杂芳基；

所述亚芳基优选为亚苯基，具体可为1,2-亚苯基、1,3-亚苯基或1,4-亚苯基；所述亚杂芳基优选为亚吡啶基，更优选为2,6-亚吡啶基。

本发明的双喹唑啉席夫碱化合物具体可为化合物1-7中的任一种：

本发明还提供了一种所述双喹唑啉席夫碱化合物的制备方法，以4-氨基喹唑啉为原料，与芳基二醛或杂芳基二醛在催化剂对甲苯磺酸(TsOH)作用下反应生成相应的所述双喹唑啉席夫碱化合物；其合成路线为：

其中Ar为亚芳基或亚杂芳基；

所述亚芳基优选为亚苯基，具体可为1,2-亚苯基、1,3-亚苯基或1,4-亚苯基；所述亚杂芳基优选为亚吡啶基，更优选为2,6-亚吡啶基。

所述双喹唑啉席夫碱化合物的制备方法，具体步骤为：

向干燥的、氮气保护的反应器中加入4-氨基喹唑啉、反应溶剂以及芳基二醛或杂芳基二醛，再加入催化剂TsOH，搅拌均匀后，回流反应，TLC点板监测反应，反应完毕，冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂，所得固体经重结晶或柱层析分离纯化，真空干燥，得所述双喹唑啉席夫碱化合物。

其中所述有机溶剂可选自甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、DMSO、DMF等中的任一种或者以上溶剂的任意混合溶剂，优选乙醇；

其中所述4-氨基喹唑啉与芳基二醛或杂芳基二醛的摩尔比优选约2:1，所述催化剂的加入量为催化量。

本发明还提供了所述双喹唑啉席夫碱化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

所述癌症选自肺癌、卵巢癌、乳腺癌或白血病。

本发明提供的一类双喹唑啉席夫碱化合物，通过设计合成了双喹唑啉席夫碱化合物，其是通过席夫碱结构连接两个喹唑啉结构单元，具有一定的抗肿瘤作用，可作为潜在的抗肿瘤药物，在生物医学、医药等领域都有着十分重要应用前景。并且此类双喹唑啉席夫碱化合物合成所需原料易得、合成方法简单、易操作，易于工业化生产。

具体实施方式

下述通过实施例进一步说明本发明，但不能限制本发明的内容。

实施例1：化合物1的制备

向干燥的、氮气保护的反应器中加入4-氨基喹唑啉(2.9g,20mmol)、乙醇30mL、间苯二甲醛(1.34g，10mmol)，再加入催化剂TsOH(0.1g)，搅拌均匀后，回流反应，TLC点板监测反应，反应完毕，冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂，所得固体经乙醇/甲苯重结晶，真空干燥，得3.38g化合物1，收率87.1％。

¹HNMR(CDCl₃,300MHz):9.41(s,2H),8.43(s,1H)，8.28(s,2H)，8.13(d,2H)，7.95(d，2H)，7.65-7.74(m，6H)7.45(t，1H).

质谱(CI，m/z)：389[M+1]⁺.

实施例2：化合物2的制备

向干燥的、氮气保护的反应器中加入4-氨基喹唑啉(2.9g,20mmol)、乙醇30mL、对苯二甲醛(1.34g，10mmol)，再加入催化剂TsOH(0.11g)，搅拌均匀后，回流反应，TLC点板监测反应，反应完毕，冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂，所得固体经乙醇/甲苯重结晶，真空干燥，得3.53g化合物2，收率91.0％。

¹HNMR(CDCl₃,300MHz):9.40(s,2H),8.25(s,2H)，8.14(d,2H)，7.97(d，4H)，7.65-7.75(m，6H).

质谱(CI，m/z)：389[M+1]⁺.

实施例3：化合物3的制备

向干燥的、氮气保护的反应器中加入4-氨基喹唑啉(2.91g,20mmol)、乙醇35mL、邻苯二甲醛(1.34g，10mmol)，再加入催化剂TsOH(0.10g)，搅拌均匀后，回流反应，TLC点板监测反应，反应完毕，冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂，所得固体经乙醇/甲苯重结晶，真空干燥，得3.28g化合物3，收率84.5％。

¹HNMR(CDCl₃,300MHz):9.40(s,2H),8.27(s,2H)，8.14(d,2H)，7.95(d，2H)，7.63-7.74(m，6H),7.43(t，2H).

质谱(CI，m/z)：389[M+1]⁺.

实施例4：化合物4的制备

向干燥的、氮气保护的反应器中加入4-氨基喹唑啉(2.91g,20mmol)、乙醇35mL、2,6-吡啶二甲醛(1.35g，10mmol)，再加入催化剂TsOH(0.10g)，搅拌均匀后，回流反应，TLC点板监测反应，反应完毕，冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂，所得固体经乙醇/甲苯重结晶，真空干燥，得3.15g化合物4，收率81％。

¹HNMR(CDCl₃,300MHz):9.40(s,2H),8.35(d，2H)，8.29(t，1H)8.14(d,2H)，7.60-7.72(m，6H),7.41(s，2H).

质谱(CI，m/z)：390[M+1]⁺.

实施例5：抗肿瘤活性实验

细胞株：人非小细胞肺癌细胞(A-549)、人卵巢癌细胞(SKOV-3)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人白血病细胞(HL-60)。

细胞培养：细胞接种在含10％小牛血清，100IU/ml青霉素G钠盐及100ug/ml硫酸链霉素的DMEM或DMEM/F12完全培养液中，置37℃、100％相对湿度、含5％C0₂的培养箱中，传代3次后备用。

MTT比色法检测：取对数生长期的细胞，经0.25％胰蛋白酶消化后(悬浮细胞无须消化)，悬浮于含10％小牛血清的培养液中，用玻璃滴管轻轻吹打成单细胞悬液，显微镜下用血细胞记数板记数活细胞。96孔培养板每孔接种细胞悬液90μl(细胞浓度为3-6×10⁴个/mL)，置培养箱24h后，每孔加10μl药液。另外，每个浓度设阴性对照(等浓度DMSO)及空白本底(不加细胞)，各组均设6个复孔。再连续培养48h，然后每孔加入10μl5mg/mL的MTT溶液，继续培养4h后，吸去上清液。每孔加入100μlDMSO，置微量振荡器震荡5min以使结晶完全溶解，于酶标仪530nm单波长比色，测定OD值，试验结果见表1。

抑制率(％)＝[1-(实验组OD均值-空白组OD均值)/(对照组OD均值-空白组OD均值)]×100％。

Bliss法计算受试化合物IC₅₀值。

对照组阳性药为吉非替尼。

表I.双喹唑啉席夫碱化合物对肿瘤细胞抑制活性

分析表I发现：化合物1、2、4均有一定的抗肿瘤活性，化合物3的活性则较弱；其中化合物1、4的活性与吉非替尼相当，并且化合物1在人卵巢癌细胞(SKOV-3)上的活性要由于吉非替尼，化合物4在人白血病细胞(HL-60)上的活性明显优于吉非替尼。

分析本申请化合物中的构效关系可以发现，间位连接喹唑啉基团的化合物1整体活性要优于对位连接的化合物2和邻位连接的化合物3；并且化合物4也属于间位连接的化合物，也从侧面印证了此类双喹唑啉化合物间位连接具有药效优势。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，依据本发明的技术实质，对以上实施例所作的任何简单的修改、等同替换与改进等，均仍属于本发明技术方案的保护范围之内。